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　　GADAb試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）往預(yù)先包被人谷氨酸脫羧酶自身抗體（GAD-Ab）獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人谷氨酸脫羧酶自身抗體（GAD-Ab）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

　　GADAb試劑盒樣品收集，處理及保存方法：

　　1.血清：使用不含熱源和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，采集血液后3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心的分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

　　3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本采集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻的充分解凍。

　　GADAb試劑盒操作注意事項(xiàng)：

　　1.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱時(shí)結(jié)晶*溶解后再使用。

　　2.實(shí)驗(yàn)中不用他的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為應(yīng)性對(duì)照或者空白，預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取10u1加樣即可。

　　4.嚴(yán)格按照說明書中表明的時(shí)間，加樣量及順序進(jìn)行溫育操作。

　　5.所有液體組分使用前充分搖勻。