肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒測試注意事項
更新時間:2021-10-25 點擊次數(shù):614次
Titin(肌聯(lián)蛋白)是目前已知的蛋白質(zhì),它的分子量為2700kDa(25000多個氨基端),根據(jù)IUPAC(國際理論和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會)命名規(guī)則,該肌聯(lián)蛋白的名字足足有189819個字母,快速讀完這個單詞需要3個多小時,即讀完它的全部25000個氨基酸名稱。
肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒利用免疫學(xué)抗原抗體分子由于結(jié)構(gòu)的互補和彼此親和性所發(fā)生特異性結(jié)合原理,并通過氧化還原化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的酶顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原,對其進行定位、定性。
起初是聯(lián)結(jié)鼠抗人平滑肌肌動蛋白免疫組化單克隆抗體和組織上的平滑肌肌動蛋白抗原;第二是酶標羊抗小鼠/兔IgG聚合物識別已經(jīng)連接上的平滑肌肌動蛋白抗體;第三,加入底物,聚合物上的辣根過氧化物酶部分可以催化DAB顯色液中的HO2分解,使聯(lián)苯胺氧化變成聯(lián)苯亞胺,使組織切片中抗原位點上出現(xiàn)黃色或棕黃色著色;結(jié)果對樣本進行復(fù)染和封片。通過顯微鏡觀測顯色情況,推斷組織切片上平滑肌肌動蛋白的存在位點和情況。為了質(zhì)量控制,提供福爾馬林固定石蠟包埋的人類子宮平滑肌瘤組織切片作為陽性對照。
肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒測試注意事項:
1、試劑準備:所有試劑在使用前應(yīng)平衡至室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2、加樣:加樣或加試劑時,孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進行實驗。
3、溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時將加上蓋或覆膜的酶標板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時候都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。