ICA ELISA試劑盒技術(shù)原理
更新時(shí)間:2017-08-16 點(diǎn)擊次數(shù):1062次
ICA ELISA試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中胰島細(xì)胞抗體(ICA)。用純化的胰島細(xì)胞抗體(ICA)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中胰島細(xì)胞抗體(ICA)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的胰島細(xì)胞抗體(ICA)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中胰島細(xì)胞抗體(ICA)的存在與否。
ICA ELISA試劑盒技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)
ICA ELISA試劑盒為防止變化,維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的管理過程,稱為防止誤差,也就是我們常說的質(zhì)量控制。在酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)中,能分離簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,大大提高了靈敏度。適用實(shí)驗(yàn)方法包括間接法、夾心法及競(jìng)爭(zhēng)法等等。